以下由武漢泰特沃斯科技有限公司色譜技術(shù)人員主要介紹人參葉中多種農(nóng)藥殘留的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜快速分析方法。GC2030系列氣相色譜儀是泰特儀器吸收國(guó)內(nèi)外先進(jìn)技術(shù)自行設(shè)計(jì)、開發(fā)、研制的新一代色譜儀，以專用儀器為主?？筛鶕?jù)用戶的要求，添加不同的檢測(cè)器，以滿足不同的要求。本儀器采用微型計(jì)算機(jī)控制，結(jié)構(gòu)緊湊?？蛇M(jìn)行在線和離線分析，方便用戶的使用。我們研制的新一代儀器具有以下功能：靈敏度高，穩(wěn)定性好，分析周期短，全新的機(jī)械工藝和電氣控制，操作簡(jiǎn)便。

人參葉為五加科植物人參的干燥葉，具有補(bǔ)氣、益肺、祛暑、生津的功效。化學(xué)成分研究表明人參葉中含有與人參根類似的皂苷類成分，其總皂苷的含量明顯高于人參根。藥理學(xué)研究表明，人參葉具有提高機(jī)體免疫力及抗炎等生理活性。隨著人類社會(huì)對(duì)健康的關(guān)注，對(duì)人參的需求量也越來越大，但由于人參生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)并且對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境的苛刻要求，目前市面上流通的人參大部分來源于人工種植。人參在人工種植栽培中不可避免的需要使用農(nóng)藥，長(zhǎng)時(shí)間的累積導(dǎo)致農(nóng)藥超標(biāo)，嚴(yán)重危害人類健康與生態(tài)環(huán)境。在我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T19506-2009中雖有野山參、移山參、鮮參、人參莖葉、花、果和人參炮制品的系統(tǒng)分類，但只制定了20種農(nóng)藥殘留限量。由此可見，我國(guó)農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)覆蓋農(nóng)藥種類過少，與發(fā)達(dá)國(guó)家比較存在很大的差異。本研究運(yùn)用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的方法，在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式下建立一種快速檢測(cè)人參葉中74種農(nóng)藥殘留的分析方法。

內(nèi)標(biāo)溶液的配制

精密稱取氘代倍硫磷對(duì)照品1mg，用乙腈定容于1 mL，配制成1g·L-1的內(nèi)標(biāo)貯備溶液，于-20℃保存。準(zhǔn)確量取內(nèi)標(biāo)貯備溶液60μL，用乙腈定容于10 mL，配制成6 mg·L-1的內(nèi)標(biāo)溶液，于4℃保存。

混合對(duì)照品溶液的配制

分別準(zhǔn)確稱取74種農(nóng)藥對(duì)照品1mg用乙腈定容于1mL，配制成1g·L-1的對(duì)照品貯備溶液，于-20℃保存。精密量取各對(duì)照品貯備溶液10μL，用乙腈定容于10mL，配制成1mg·L-1的混合對(duì)照品溶液，精密量取1mg·L-1的混合對(duì)照品溶液5、10、50、100、200、400、600μL，再加入100μL內(nèi)標(biāo)溶液，用乙腈定容于1mL，配制成0.005、0.01、0.05、0.1、0.2、0.4mg·L-1含有內(nèi)標(biāo)的系列對(duì)照品溶液，于4℃保存。

樣品溶液的配制

干燥人參葉粉碎后過3號(hào)篩，準(zhǔn)確稱取人參葉粉3g于50mL聚丙乙烯具塞離心管中，加入超純水15mL，渦旋使藥粉充分浸潤(rùn)，放置30min，精密加入乙腈15mL與內(nèi)標(biāo)溶液100μL，渦旋混勻，置振蕩器上劇烈振蕩(300次·min-1)5min，加入QuEChERS萃取試劑盒試劑(無水硫酸鎂：無水乙酸鈉=4∶1)7.5g，渦旋使其混勻，再置振蕩器上劇烈振蕩(300次·min-1)5min，于冰浴中冷卻10min，離心(4000轉(zhuǎn)·min-1)10min，取上清液9mL，置QuEChERS分散固相萃取凈化管(無水硫酸鎂1200mg，N-丙基乙二胺400mg，十八烷基鍵和硅膠400mg，石墨化炭黑45mg)中，渦旋使其充分混勻，再置振蕩器上劇烈振蕩(300次·min-1)5min使其凈化完全，離心(4000轉(zhuǎn)·min-1)10min，精密吸取上清液5mL，置氮吹儀上于40℃水浴濃縮至約0.4mL，加乙腈定容于1mL，渦旋混勻，用0.22μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。

色譜條件

進(jìn)樣口溫度270℃，，載氣為高純氦氣(He)，純度﹥99.99%，流速1.2mL·min-1，進(jìn)樣量1 μL，進(jìn)樣方式不分流，程序升溫：初始溫度60℃，保持1min，以30℃·min-1速率升至180℃，不保持，以10℃·min-1速率升至300℃，保持5min。

質(zhì)譜條件

以三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)，離子源為電子轟擊源(EI)，離子源溫度300℃，傳輸線溫度為280℃，電子倍增電壓1.0kV，采用乙腈稀釋各個(gè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品至10mg·L-1，對(duì)每個(gè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行全掃描，確定每種農(nóng)藥的母離子質(zhì)荷比，然后在正離子模式下對(duì)母離子進(jìn)行子離子掃描，并從中選出2個(gè)豐度比較高的子離子作為定量離子，建立多離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)離子對(duì)。

本實(shí)驗(yàn)采用“QuEChERS”方法(quick，easy，cheap，effective，rugged and safe)對(duì)樣品進(jìn)行前處理，已有越來越多的研究人員將QuEChERS法引入到復(fù)雜樣品的農(nóng)藥殘留分析中，而將此方法運(yùn)用到對(duì)人參葉提取物的分析方面的報(bào)道較少。QuEChERS法的原理是樣品經(jīng)乙腈提取、鹽析后，用固相分散萃取劑與基質(zhì)中絕大部分干擾物結(jié)合，通過離心的方式去除，從而達(dá)到凈化的目的。人參葉為葉類藥材，使用有機(jī)溶劑提取樣品中的農(nóng)藥時(shí)，樣品中的有機(jī)酸、脂類、糖類、蛋白質(zhì)、類胡蘿卜素和葉綠素等會(huì)同農(nóng)藥一起被提取出來，QuEChERS法可以起到良好的凈化作用，有效地減少其他物質(zhì)對(duì)農(nóng)藥殘留物的測(cè)定的干擾。在定量分析方面采用內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法，可有效地減少基質(zhì)效應(yīng)。結(jié)果表明，該方法具有良好的線性關(guān)系、回收率和精密度，同時(shí)簡(jiǎn)化了樣品的前處理操作步驟，提高了凈化效果，實(shí)現(xiàn)了快速、簡(jiǎn)便、精確、普遍適用的分析要求。