柱前衍生和柱后衍生
為什么要衍生?
衍生化最為主要的目的就是提高目的物的可檢測性。對于氣相色譜儀來講,多數(shù)是為了增強(qiáng)目的物揮發(fā)性或者改善目的物極性;對于高效液相色譜法來講多數(shù)是為了提高檢測器對目的物的相應(yīng)。
衍生化分類:柱前衍生和柱后衍生
柱前衍生:在經(jīng)過分析柱前使分析物與衍生劑反應(yīng),反應(yīng)產(chǎn)物在分析柱上實(shí)現(xiàn)分離,實(shí)際分離的是衍生產(chǎn)物,檢測的也是衍生產(chǎn)物;
柱后衍生:分離物在分析柱中實(shí)現(xiàn)分離后,在衍生池內(nèi)與衍生劑反應(yīng),在柱子中分離的是目的物,在檢測器處檢測的衍生產(chǎn)物。
適用的化合物:生物酸/堿、胺類、抗生素(聚醚類抗生素多見)和氨基酸類。
衍生化要求?
1)衍生劑必須過量且穩(wěn)定;不過量反應(yīng)不完全,檢測不充分。不穩(wěn)定,重現(xiàn)性差。
2)衍生物、衍生產(chǎn)物和衍生副產(chǎn)物至少是好分離的。當(dāng)然如果只能檢測到衍生產(chǎn)物最好。
3)衍生反快速完全。反應(yīng)慢,柱前衍生還可以,但柱后不行。因?yàn)榱魉俟潭ǎ苌毓苈烽L度一定,留給衍生化的時(shí)間是一定的。柱前衍生可以在系統(tǒng)外等衍生完畢后進(jìn)樣,但也是影響效率的。
兩種衍生比較
柱前衍生
優(yōu)點(diǎn):對設(shè)備要求不高,可以手工衍生,而且對衍生時(shí)間要求相對寬泛。
缺點(diǎn):引入了過多的物質(zhì),如:衍生劑、衍生產(chǎn)物(當(dāng)然這個(gè)是檢測需要的)和衍生副產(chǎn)物,對柱子有潛在的負(fù)面影響,另如采用手工衍生也會引入過多的認(rèn)為因素。
柱后衍生
優(yōu)點(diǎn):重現(xiàn)性好,認(rèn)為因素少,引入物質(zhì)比較少。
缺點(diǎn):可能有擴(kuò)散問題,在柱子中分離結(jié)束后,就存在擴(kuò)散,如果衍生慢(必然流速低)、管路長擴(kuò)散問題就會比較嚴(yán)重,再有就是要求有一套外源的泵系統(tǒng)和一個(gè)檢測池,對于設(shè)備要求較高。
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