氣相色譜外標(biāo)法
武漢泰特儀器產(chǎn)品涵蓋氣相色譜儀、氣相色譜配套、樣品處理設(shè)備、柱后衍生系統(tǒng)等,是國內(nèi)領(lǐng)先的分析儀器系統(tǒng)供應(yīng)商。GC2030氣相色譜儀是武漢泰特沃斯科技有限公司吸收國內(nèi)外先進(jìn)技術(shù)自行設(shè)計、開發(fā)、研制的新一代色譜儀。氣相色譜法因其分離時間短和分離效果好等特點,其應(yīng)用范圍也越來越廣。
氣相色譜法在測定蘇籽中α-亞麻酸含量中相應(yīng)方法建立的相關(guān)報道較少。本文以外標(biāo)法測定蘇籽中α-亞麻酸含量。正己烷抽提蘇籽中的α-亞麻酸,測定經(jīng)氫氧化鉀-甲醇皂化甲酯化后形成的α-亞麻酸甲酯的含量,直接得出蘇籽中α-亞麻酸的含量。
紫蘇籽,又名蘇籽或穎子,含有豐富的脂肪和蛋白質(zhì),是迄今為止發(fā)現(xiàn)的含有α-亞麻酸最多的植物物種,油中α-亞麻酸含量占其總脂肪酸的60%左右。α-亞麻酸為十八碳三烯酸,是大腦和神經(jīng)活動所必需的脂肪酸,人體自身不能合成,必須由食物供給,可在體內(nèi)酶的作用下經(jīng)肝臟的代謝生成EPA(血管清道夫)和DHA(腦黃金),具有顯著的藥理作用和營養(yǎng)價值,被稱為“21世紀(jì)綠色營養(yǎng)保健食品”。此外,α-亞麻酸還具有抗炎癥、抗血栓、抗血凝、抗過敏、抗心率失調(diào)、降血脂、改善血管彈性、調(diào)節(jié)中央神經(jīng)系統(tǒng)等功能,在醫(yī)藥、保健品、食品等領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。我們?nèi)粘o嬍持凶钊狈Ρ匦柚舅崾?alpha;-亞麻酸,我國醫(yī)學(xué)界和營養(yǎng)界專家紛紛呼吁國家立法,國家食品與營養(yǎng)發(fā)展戰(zhàn)略專家也正積極規(guī)劃,專項推廣補(bǔ)充α-亞麻酸。
方法與步驟
1、色譜條件
載氣為氮氣;檢測器為氫火焰離子化檢測器(FID);進(jìn)樣口溫度為250℃,檢測器溫度為270℃。氫氣:40mL/min;空氣:400mL/min;分流比:10∶1;進(jìn)樣量:1μL。恒流進(jìn)樣,流速:1mL/min,平均線速度:21cm/s。升溫程序:起始溫度90℃,7℃/min到190℃,3℃/min到215℃,保持10min,20℃/min到230℃后運(yùn)行5min。
2、溶液的配制
0.8mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液:電子天平稱取0.448g氫氧化鉀溶于裝有適量甲醇的燒杯中,靜置室溫后將溶液轉(zhuǎn)移到10mL 的容量瓶中,用甲醇定容。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的配制
精確稱取α-亞麻酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品100.00mg,正己烷定容,分別配制0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0、10.00mg/mL的α-亞麻酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品溶液,置于-20℃的冰箱中備用。1.3.4 蘇籽油脂的甲酯化氫氧化鉀-甲醇酯化法:用移液管吸取0.1mL 脂肪酸置于10mL 量瓶中,依次加入1mL乙醚-正己烷混合溶液(乙醚∶正己烷=2∶1)和1mL氫氧化鉀(0.8mol/L)-甲醇溶液,充分振蕩,靜置5min后加蒸餾水至刻度,靜置分層,吸上清液,加入少量無水硫酸鈉干燥過夜后,進(jìn)行上機(jī)檢測。
4、色譜的定性與分離
采用色譜條件,對蘇籽中的α-亞麻酸有很好的分離效果。采用保留時間對照法確定α-亞麻酸甲酯的位置。由圖可見,α-亞麻酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間為22.785min,具有良好對稱峰型。
α-亞麻酸甲酯的氣相色譜分離圖
采用氣相色譜外標(biāo)法測定蘇籽油中α-亞麻酸含量,α-亞麻酸甲酯的線性檢測范圍為0.01~10.00mg/mL,r=0.9981,方法平均回收率為100.1%。該法快速、準(zhǔn)確、可行,適用于蘇籽α-亞麻酸含量的測定。蘇籽油中a-亞麻酸含量測定中,各種測定方法之間進(jìn)行比較的研究較少,尋找準(zhǔn)確、簡單、低價、快速測定的方法測定蘇籽內(nèi)a-亞麻酸含量對蘇籽的開發(fā)利用具有一定的意義。氣相色譜法具有分離時間短、分離性好、操作簡單實用、檢測快速準(zhǔn)確、成本低且可行性高等特點,適用于蘇籽中α-亞麻酸含量的測定。
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