頂空氣相色譜法測(cè)定血液中的酒精含量
2008年世界衛(wèi)生組織的事故調(diào)查顯示,大約50%~60%的交通事故與酒后駕駛有關(guān),酒后駕駛已經(jīng)被列為車(chē)禍致死的主要原因。在中國(guó),每年由于酒后駕車(chē)引發(fā)的交通事故達(dá)數(shù)萬(wàn)起;而造成死亡的事故中50%以上都與酒后駕車(chē)有關(guān),酒后駕車(chē)的危害觸目驚心,已經(jīng)成為交通事故的第一大“殺手”。根據(jù)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫局發(fā)布的《車(chē)輛駕駛?cè)藛T血液、呼氣酒精含量閾值與檢驗(yàn)》(GB19522—2004)中規(guī)定,駕駛?cè)藛T每血液酒精含量大于等于20mg/100mL小于80mg/100mL為酒后駕車(chē);血液酒精含量大于或等于80mg/100mL為醉酒駕車(chē)。本文參照公安部GA/T842-2009標(biāo)準(zhǔn),以叔丁醇為內(nèi)標(biāo),頂空-氣相色譜法分析血液中的酒精含量。該方法準(zhǔn)確可靠,重復(fù)性好。
1.實(shí)驗(yàn)部分
1.1儀器與試劑島津GC-2010Plus氣相色譜儀,配FID檢測(cè)器,頂空進(jìn)樣器(DANIHSS-86.50)
1.2分析條件
1.2.1色譜條件
色譜柱:Stabilwax,30m×0.25mm×0.25μm
進(jìn)樣口溫度:200℃
柱溫程序:70℃(4min)20℃/min150℃(1min)
柱流量:1.2mL/min
進(jìn)樣方式:分流
分流比:5:1
檢測(cè)器溫度:230℃
氫氣流量:40mL/min
空氣流量:400mL/min
尾吹氣流量:30mL/min
1.2.2頂空條件
平衡溫度:70℃
平衡時(shí)間:15min
定量環(huán)溫度:105℃
傳輸線溫度:110℃
1.3樣品制備
用移液槍移取0.50mL待測(cè)血液樣品于頂空瓶中,加入0.1mL叔丁醇水溶液(200mg/100mL)作為內(nèi)標(biāo),密封后待測(cè)試。
2.結(jié)果討論
2.1乙醇和叔丁醇的色譜圖
圖1 以血液為基質(zhì)的乙醇和叔丁醇色譜圖(濃度80 mg/100mL)
2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線
用移液槍移取0.5mL空白血液樣品于頂空瓶中,加入一定量的乙醇水溶液,得到5、20、40、80、160mg/100mL標(biāo)準(zhǔn)系列濃度,再分別添加0.1mL叔丁醇水溶液(200mg/100mL)作為內(nèi)標(biāo)。頂空進(jìn)樣,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖2,相關(guān)系數(shù)為0.9995。
圖2 乙醇的標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.3回收率測(cè)試及檢出限
用移液槍移取0.5mL空白血液樣品于頂空瓶中,加入一定量濃度為1000mg/100mL乙醇水溶液,加標(biāo)濃度分別為5、20、80mg/100mL,每種濃度取三份平行樣。再分別添加0.1mL叔丁醇水溶液(200mg/100mL)作為內(nèi)標(biāo)。按照上述前處理步驟進(jìn)行回收率測(cè)試,結(jié)果見(jiàn)下表1。
表1 樣品加標(biāo)回收率及檢出限
3.結(jié)論
利用島津GC-2010Plus氣相色譜儀結(jié)合頂空進(jìn)樣,對(duì)血液中的乙醇含量進(jìn)行檢測(cè),該方法結(jié)果準(zhǔn)確可靠,重復(fù)性好,回收率在90%~110%之間。完全能滿足日常檢測(cè)的要求。